Xác định đồng thời capsanthin và capsorubin trong thực phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao sử dụng detector PDA

Tóm tắt

Phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC-PDA) được sử dụng để xác định đồng thời capsanthin và capsorubin trong thực phẩm. Đây là hai hợp chất carotenoid chính tạo màu đỏ được tìm thấy trong loài ớt chuông (Capsicum annuum) và loa kèn (Lilium). Chất phân tích được chiết siêu âm bằng hỗn hợp acetonitril (ACN): Ethyl acetat tỷ lệ 1:1 chứa dung dịch butyl hydroxytoluen (BHT) 0,1% tại nhiệt độ 40oC trong 20 phút. Dịch chiết sau đó được xác định bằng sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC–PDA với các điều kiện: Cột InterSustain C18 (250 mm x 4,6 mm; 5 µm) và tiền cột tương ứng (5 mm x 3,9 mm; 5 µm), pha động gồm hỗn hợp các dung môi amoni acetat 5mM, ACN, MeOH và H2O theo chương trình gradient, bước sóng phát hiện 450 nm. Phương pháp có độ đặc hiệu tốt, đường chuẩn của capsanthin và capsorubin có hệ số xác định R2 > 0,9997 và độ lặp lại, độ thu hồi đạt yêu cầu của AOAC. Giới hạn phát hiện (LOD) và giới hạn định lượng (LOQ) của hai chất này là 0,20 mg/kg và 0,67 mg/kg. Phương pháp đã được áp dụng để xác định đồng thời capsanthin và capsorubin trong 35 sản phẩm thực phẩm khác nhau gồm bột ớt, gia vị, nước giải khát, đồ hộp và bánh kẹo, kem, pho mai. Kết quả phân tích đã phát hiện hàm lượng capsanthin là 10,5 - 15,8 mg/kg trong ớt bột và 3,86 - 9,78 mg/kg trong gia vị, hàm lượng capsorubin là 2,86 - 3,92 mg/kg trong ớt bột và 0,76 - 1,64 mg/kg trong gia vị.