Nghiên cứu phân tích caffeine và theobromine trong đồ uống, nguyên liệu pha chế đồ uống và dược phẩm bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector mảng diode (HPLC-DAD)
Tóm tắt
Một phương pháp phân tích đơn giản và đáng tin cậy để xác định caffeine và theobromine trong đồ uống (đồ uống cola, nước trà đóng chai, nước tăng lực), nguyên liệu pha chế đồ uống (bột ca cao, hạt cà phê xanh, bột cà phê rang, bột matcha, trà túi lọc) và dược phẩm (thuốc giảm đau và hạ sốt) đã được phát triển và thẩm định trên hệ thống sắc ký lỏng hiệu năng cao với detector mảng diode (HPLC-DAD). Đồ uống cola và nước tăng lực được khử khí, pha loãng và lọc trước khi phân tích, trong khi bước làm sạch sử dụng magnesium oxide (MgO) được áp dụng cho nước trà đóng chai. Các mẫu nguyên liệu đồ uống được chiết bằng nước nóng kết hợp với làm sạch bằng MgO. Các dược phẩm được chiết siêu âm với hỗn hợp nước/methanol (70:30, v/v). Caffeine và theobromine được tách hoàn toàn trên cột C18 (15 cm × 4,6 mm × 5 μm) với phương pháp rửa giải đẳng dòng sử dụng pha động là hỗn hợp nước/methanol (70:30, v/v) ở tốc độ dòng 0,7 mL/phút. Tín hiệu phân tích của hai chất phân tích được ghi nhận ở bước sóng 272 nm. Phương pháp phân tích trên thiết bị cho thấy độ lặp lại tốt (RSD < 5%), độ tuyến tính tốt (R2 > 0,999 trên khoảng nồng độ 5–500 mg/L) và giới hạn phát hiện phù hợp (LOD = 1 mg/L). Quy trình phân tích cho các nền mẫu khác nhau đã được thẩm định với độ thu hồi (89–106%) và độ lặp lại (RSD < 5%) chấp nhận được. Các phương pháp sau khi thẩm định đã được áp dụng để phân tích caffeine và theobromine trong 40 mẫu thực tế. Trong hầu hết các mẫu đồ uống và mẫu thuốc, nồng độ caffeine đo được đều phù hợp với giá trị công bố trên nhãn (độ chệch < 10%).