Nghiên cứu biểu hiện enzyme AA10 trong E. coli

Tóm tắt

    Protein bám GlcNAc (GbpA) là một nhân tố độc lực của chủng gây bệnh Vibrio vulnificus. Domain 1 của GbpA bám dính ở cả bề mặt của ruột người và chitin. Cấu trúc của tiểu phần 1 tương đồng với một loại enzyme polysaccharide monooxygenase có thể thực hiện phản ứng oxy hóa đối với các chuỗi chitin khó phá vỡ. Vai trò của tiểu phần VvPMO10 trong hoạt động xúc tác hiện nay vẫn chưa được mô tả đầy đủ trong in vitro. Đối tượng của nghiên cứu này là VvPMO10, protein này được dòng hóa vào hệ thống biểu hiện pET22b và biến nạp vào trong tế bào E. coli BL21 (DE3). Protein tái tổ hợp được biểu hiện ở điều kiện 37℃ khi cảm ứng với IPTG. Protein tổng được kiểm tra bằng phương pháp SDS-PAGE và nhuộm phát hiện bằng dung dịch Coomassie blue. Vạch protein mục tiêu thu được có kích thước 20kDa tương tự kích thước lý thuyết, chứng tỏ protein tái tổ hợp đã được biểu hiện thành công trong chủng E. coli BL21 (DE3). Kết quả này đóng góp dữ liệu cho những nghiên cứu tiếp theo