TÁCH DÒNG PHÂN TỬ VÀ THIẾT KẾ VECTOR CHUYỂN GEN MANG GEN FLAVONOID 3’ 5’ HYDROXYLASE PHÂN LẬP TỪ CÂY Ô ĐẦU (Aconitum carmichaelii Debx.)

Tóm tắt

Cây Ô đầu (Aconitum carmichaelii Debx.) là loại cây dược liệu chứa nhiều loại dược chất quý, trong đó có flavonoid. Flavonoid là chất quan trọng có tác dụng chống oxy hóa, chống tăng sinh tế bào và đặc biệt là chống ung thư, nhưng hàm lượng flavonoid tự nhiên trong Ô đầu lại rất thấp. Flavonoid 3' 5' hydroxylase (F3'5'H) là enzyme quan trọng xúc tác cho phản ứng cuối cùng trong quá trình sinh tổng hợp flavonoid ở cây ô đầu. Do vậy tiếp cận nghiên cứu biểu hiện mạnh gen mã hóa F3’5’H nhằm nâng cao hàm lượng flavonoid trong ô đầu là hướng mới, hiệu quả được đặt ra trong chiến lược nghiên cứu cây dược liệu. Trong bài báo này, nhóm tác giả trình bày đặc điểm của gen Aconitum carmichaelii flavonoid 3' 5' hydroxylase (AcF3’5’H) phân lập từ mRNA của cây Ô đầu và thiết kế cấu trúc mang gen chuyển AcF3’5’H  trong vector biểu hiện thực vật pCB301 phục vụ phân tích tăng cường biểu hiện gen AcF3’5’H trên các cây ô đầu chuyển gen. Đoạn mã hóa của gen AcF3’5’H có 1521 bp, mã hóa 506 amino acid. Cấu trúc mang gen chuyển AcF3’5’H trong vector chuyển gen pCB301 chứa promoter 35S, trình tự c-myc và KDEL. Vector chuyển gen pCB301_AcF 3’5’H được biến nạp vào Agrobacterium tumefaciens tạo vi khuẩn tái tổ hợp.