THẨM ĐỊNH PHƯƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI CYNARIN VÀ CHLOROGENIC ACID TRONG CAO CHIẾT CÂY ACTISO BẰNG SẮC KÝ LỎNG PHA ĐẢO HIỆU NĂNG CAO

Tóm tắt

Trong nghiên cứu này, phương pháp sắc ký lỏng pha đảo (RP-HPLC) được sử dụng để thẩm định xác định hàm
lượng cynarin và chlorogenic acid trong cao trích cây actiso. Cynarin và chlorogenic acid được tách trên cột
Shim-pack GISS C18 column (2,1 mm x 100 mm), kích cỡ hạt 1,9 µm, nhiệt độ 30 oC và đầu dò PAD đặt ở
bước sóng 325 nm đối với cynarin và 321 nm đối với chlorogenic acid. Pha động là hỗn hợp MeOH và AcOH
5% ở tỉ lệ thể tích 10:90, tốc độ dòng 1,5 ml/phút. Tổng thời gian phân tích mỗi mẫu xấp xỉ 25 phút, trong đó
thời gian lưu của cynarin và chlorogenic acid lần lượt là 10,939 phút và 21,969 phút. Khoảng tuyến tính của
cynarin trong khoảng nồng độ từ 31,5 đến 73,5 µg/mL, phương trình hồi quy y = 16736x + 31934, hệ số tương
quan r2 = 0,9998 và khoảng tuyến tính của chlorogenic acid ứng với nồng độ từ 39,0 đến 91,0 µg/mL, phương
trình hồi quy y = 19094x + 43864, hệ số tương quan r2 = 0,9996. Giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của
cynarin là 0,64 µg/mL và 1,93 µg/mL và của chlorogenic acid là 0,30 µg/mL và 0,90 µg/mL. Hiệu suất thu hồi
từ 96,15% đến 100,73% đối với cynarin và từ 98,53% đến 103,14% đối với chlorogenic acid. Phương pháp
được đánh giá qua độ đúng, độ chính xác, độ đặc hiệu, độ tuyến tính, độ ổn định và độ nhạy.