Xây dựng quy trình Real Time - PCR trên 16S rRNA gen của vi khuẩn Lao MYCOBACTERIUM TUBERCULOSIS

Tóm tắt

Hiện nay, lao vẫn là một trong những bệnh nhiễm khuẩn thường gặp nhất, nguyên nhân chủ yếu là do nhiễm vi khuẩn Mycobacterium tuberculosis. PCR là kỹ thuật sinh học phân tử được sử dụng làm phương pháp phát hiện các tác nhân nhiễm đặc biệt là nhiễm virus hay các vi khuẩn khó nuôi cấy như trường hợp của Mycobacterium tuberculosis bởi phương pháp này cho kết quả nhanh, chính xác và có độ nhạy cao. Nghiên cứu này được thực hiện nhằm mục đích xây dựng quy trình Realtime PCR sử dụng trình tự gen đích 16SrRNA, một trình tự được ứng dụng nhiều trong các lĩnh vực phân loại học, tiến hóa học và chẩn đoán y học. Chúng tôi đã thành công trong việc thiết kế hệ mồi/mẫu dò trên 16SrRNA gen nhằm phát hiện vi khuẩn lao bằng kỹ thuật Realtime PCR, đã xác định các thông số về tính đặc hiệu của hệ mồi/mẫu dò trên lý thuyết và thực nghiệm, độ nhạy của mồi/mẫu dò trong quy trình Realtime PCR phát hiện DNA vi khuẩn lao đạt số lượng bản mẫu tối thiểu là 102 bản sao /ml và đã thử nghiệm quy trình Realtime PCR phát hiện vi khuẩn lao trên 30 mẫu bệnh phẩm ghi nhận kết quả tốt.