Sản xuất protein erythropoietin thông qua quá trình chuyển gen trên tế bào cho - K1 (chinese hamster ovary)

Abstract

Erythropoietin (EPO) là nhân tố tăng trưởng máu, chịu trách nhiệm chính cho việc kích thích, điều hòa sự sản xuất hồng cầu ở động vật hữu nhũ. EPO được sử dụng trong điều trị bệnh thiếu máu liên quan đến suy thận mãn tính. EPO tái tổ hợp trên thị trường rất khan hiếm và có giá thành cao. Quá trình chuyển gene epo vào tế bào CHO - K1 bằng ExGen 500 được thực hiện nhằm tạo dòng tế bào có khả năng sản xuất Erythropoietin. Sau khi xác định sự biểu hiện protein tạm thời thành công, tế bào được nuôi cấy chọn lọc trong môi trường có Zeocin (100 µg/ml). Bằng phương pháp PCR, tế bào sau chọn lọc được xác định có sự biểu hiện gen epo. Năng suất sản xuất EPO trung bình của những tế bào này  được  định lượng qua phương pháp ELISA sandwich là 2,055 ± 0,015 pg/tế bào/ngày.